摘要:冬虫夏草(Cordycepssinensis)为麦角菌科冬虫夏草菌的子座及其寄主蝙蝠蛾科昆虫冬虫夏草蝙蝠幼虫尸体的复合体。味甘性平,能补虚损、益精气,是一种名贵的药用真菌,有免疫调节、降血糖、抗肿瘤以及抗脂质过氧化损伤等多种药理作用。
作者:田燕蒋妮田舸
来源:中国医院药学杂志
摘要目的:制备不同浓度冬虫夏草多糖凝胶剂并考察其对深Ⅱ°烫伤的治愈效果。方法:将脱毛后的家兔以红外灯照射方法制成深Ⅱ°烫伤动物模型,以自提的冬虫夏草多糖制备的凝胶剂为实验组,以湿润烫伤膏(关宝)为阳性对照组处理烫伤动物模型,在不同时间点观察烫伤创面收缩情况,计算创面直径平均值。结果:家兔皮肤烫伤模型涂抹湿润烫伤膏(美宝)与1%,5%冬虫夏草多糖凝胶剂,烫伤创面无感染,愈合面光滑平整;但创面收缩直径比较结果为5%冬虫夏草多糖凝胶剂实验组较湿润烫伤膏(美宝)及不合药的甘油明胶基质空白对照组显著减小,差异具有显著性(P<0.05)。结论:1%,5%冬虫夏草多糖凝胶剂与湿润烫伤膏(美宝)组对家免皮肤烫伤模型均有明显修复作用,但5%冬虫夏草多糖凝胶剂对家免皮肤烫伤模型的修复作用较好。
冬虫夏草(Cordycepssinensis)为麦角菌科冬虫夏草菌的子座及其寄主蝙蝠蛾科昆虫冬虫夏草蝙蝠幼虫尸体的复合体。味甘性平,能补虚损、益精气,是一种名贵的药用真菌,有免疫调节、降血糖、抗肿瘤以及抗脂质过氧化损伤等多种药理作用。随着人们逐渐发现和认识冬虫夏草的滋补疗效和提高人体免疫功能,它的开发利用倍受世人的关注。而烫伤破坏皮肤天然屏障,血液循环障碍或丧失血液灌注,局部营养缺乏,全身免疫力下降,为细菌入侵创造良好的条件。同时大面积烫伤后出现机体免疫功能紊乱,全身炎性反应失衡,患者极易并发感染而死亡,因此在治疗烫伤的同时有必要调节机体的免疫功能。鉴于冬虫夏草具有优良的免疫调节作用,故本试验选用冬虫夏草中最主要的活性物质——冬虫夏草多糖(Cordyceps polysaccharide),考察其对烫伤创面的修复作用。
1 材料
Olympus CX31型数显显微镜(日本奥林巴斯株式会社);徕卡(Leica)RM2245石蜡切片机(德国徕卡公司);250W红外灯(上海惠光照明电器有限公司);数显卡尺(桂林量具刀具厂);湿润烫伤膏(美宝)(汕头市美宝制药有限公司,批号20060404);冬虫夏草粗多糖(大连医科大学药剂学教研室自提);所用试剂均为分析纯;新西兰兔(体质量2.0~2.2kg,雌雄不限,大连医科大学动物中心提供);水为注射用水。
2 方法和结果
2.1 不同剂量冬虫夏草多糖凝胶剂的制备取明胶0.400g置已知质量的蒸发皿中,加注射用水适量,浸泡30 min,使膨胀变软,沥去多余的水分。加入甘油2.000 g在水浴上加热使明胶溶解,继续加热使内容物质量达所需质量为止,制成甘油明胶基质[甘油-明胶-水(10:1:39)]20.000 g。分别称取冬虫夏草多糖0.020,0.200,1.000 g,在搅拌下分别加入到已制好的19.980,19.800,19.000 g甘油明胶基质中,混合均匀,得样品Ⅰ(含药0.1 %)、样品Ⅱ(含药1% )和样品Ⅲ(含药5% )。
2.2 不含药的甘油明胶基质的制备取明胶0.400g置已知质量的蒸发皿中,加注射用水适量,浸泡30min,使膨胀变软,沥去多余的水分。加入甘油2.000 g在水浴上加热使明胶溶解,继续加热使内容物质量达所需质量为止,制成不含药的甘油明胶基质[甘油-明胶-水(10:1:39)]20.000 g,作为空白对照。
2.3 烫伤动物模型的建立健康白色家兔9只,雌雄不限,在实验室单笼饲养3d后,剪毛并在剪毛区用水润湿,涂新鲜调配的硫化钡糊(一份硫化钡+一份滑石粉+半份洗衣粉+水=调成稀糊状),10~15min后用热毛巾轻轻擦去,用清水洗净即可将动物背部左、右两侧皮肤用脱毛剂脱毛。约12 h后各取5个点(左侧供观察创面收缩情况,右侧用于切取病理组织),在乙醚麻醉下,75%酒精消毒脱毛区皮肤,用250 W 红外灯照射15s,造成直径20mm局部皮肤深Ⅱ°烫伤。
2.4 深Ⅱ°烫伤动物皮肤的确定取健康白色家兔的正常皮肤及深Ⅱ°烫伤后的皮肤若干片用HE染色制作切片标本,用奥林巴斯数显显微镜(×400)照得切片图片,见图2。
2.5 修复作用观察烫伤后24h,开始涂抹药物,bid,每次20 mg,连续涂抹药物直至烫伤面痊愈。每日用数显卡尺(0.02mm)测量创面直径,观察创面收缩情况,结果见表1。
3 讨论
结果表明,动物皮肤烫伤后,每日两次涂抹冬虫夏草多糖凝胶剂及湿润烫伤膏(美宝),动物烫伤面无感染,此两组的愈合面较空白对照组的愈合面光滑平整,但创面直径比较结果,5%冬虫夏草多糖凝胶剂组较湿润烫伤膏(美宝)对照组及空白对照组显著减小,差异具有显著性(P<0.05);1%冬虫夏草多糖凝胶剂组较湿润烫伤膏(美宝)对照组比较结果差异无显著性;0.1%冬虫夏草多糖凝胶剂组较湿润烫伤膏(美宝)对照组创面直径大,愈合慢。动物皮肤烫伤模型的制作多数采用激光、恒温恒压电烫仪、手提压力蒸汽消毒器等方法,成本高,应用不方便,而我们设计的用250 W 红外灯照射不同的时间即可达到所需要的不同深度的烫伤模型(通过大量的用HE染色制作烫伤病理切片标本,验证为所需要深度的烫伤模型),具简单、经济、使用方便,重复性好,烫伤深度易控制。
经过资料检索分析,冬虫夏草多糖凝胶剂对家兔皮肤烫伤后的修复可能有如下作用:(1)冬虫夏草多糖能提高机体的免疫功能:它对机体网状内皮系统巨噬细胞的噬功能具有明显的激活作用,能促进淋巴细胞的转化,使体液免疫功能增加。(2)参与创伤愈合后功能的完善:CP分子具有伸缩性,能根据创伤愈合后机体功能的需要,对创伤修复所形成的瘢痕组织进行改建,使创伤愈合后结构适应功能的需要。
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